PLR TRADUZIO (X) Apr 7, 2014:

Toujours pour Francois: Explanation ????
La technique est à la fois :
(1) "sandwich", c-à-d un Ag pris en sandwich entre 2 Ac
NON c’est un Ac qui est ici en sandwich
(2) "par compétition", c-à-d que le réactif primaire (ici un Ac, puisqu'il y a sandwich) est limité et limitant pour qu'il y ait compétition.
NON il n’existe aucun dosage ELISA où on met un Ac en qt limitante
(3) Il en découle que c'est un Ag qui est dosé et qu'un autre Ag entre en compétition, porteur d'un même épitope.
NON il y a un seul Ag (HBe)
(4) Il en découle aussi que l'Ac révélateur marqué luminescent est spécifique de l'Ag à doser en se fixant sur un 2ème épitope propre au 1er Ag, et complète le sandwich.
NON il n’y pas de 2ème épitope du 1 Ag
(5) Il s'agit donc d'un immunodosage luminométrique sandwich d'Antigène par compétition (entre 2 antigènes)
NON 1 seul Ag

PLR TRADUZIO (X) Apr 7, 2014:

@François J'ai déjà posté le link à ce test. Principe du dosage: on utilise deux Ac monoclonaux anti HBe, le premier marqué ABEI, le second marqué FITC. Les deux anticorps sont mis en compétition pour lier l’Ag sérique HBe, formant deux types de complexes Ag-Ac. On prend les nanobilles magnétiques que l'on recouvre d’Ac anti-FITC. Les complexes Ag-Ac, dont l’anticorps anti HBe est marqué FITC, vont donc se fixer sur les billes: voila le sandwich (Ac anti-FITC-Ac anti-HBe marqué FITC – Ag Hbe). On récupère les billes (champ magnétique) et on mesure la Fluo de FITC par CLIA.
François, le sanwdwich est assez gros. Je répète: Anticoprs anti FITC - FITC marquant l'Ac anti HBe qui a lié l'Ag HBe: C'est donc Ac-Ac-Ag. C'est plus clair ?

François Begon Apr 7, 2014:

Où est le sandwich dans cette méthode ? Il est souhaitable que ceux qui sont sûrs d'eux, puissent répondre.
car, il faut que ce soient deux Ac prenant en sandwich un antigène ou deux antigènes prenant en sandwich un anticorps, pour qu'on parle de méthose sandwich !

PLR TRADUZIO (X) Apr 5, 2014:

François 1/ La compétition est expliquée ici: Use anti-HBe monoclonal antibody to label ABEI, another monoclonal antibody to label FITC. Add limited free HbeAg. ABEI Label and FITC Label are competed to conjugate HBeAg with Sample, Calibrator or Control, and diluted human serum, forming antibody-antigen complexes
2/ Si ce dosage n'est pas "compétitif", pourquoi proposes-tu "immunodosage luminométrique sandwich d'Antigène par compétition" ?
3/ Pourquoi utilises-tu antigène alors qu'il s'agit d'anticorps ?
Hepatitis B e-antigen (HBeAb IgG) is an HBV protein that is only present during an active HBV infection. This test determines how contagious you are. Testing for this antigen can also be used to monitor the effectiveness of treatment for HBV. Hepatitis B e-antibody (HBeAb) shows that the active stage of the HBV infection is almost over and your risk of being contagious is greatly reduced. HBeAb is usually present during chronic HBV infections.
C'est l'Ab qui est dosé, pas l'Ag:
11 Results
11.1 Calculation of Results
The analyzer automatically calculates the HBeAb IgG concentration
in each sample by means of a calibration curve which is generated by
a 2-point calibration master curve ....

François Begon Apr 5, 2014:

Où est la compétition dans cet immunodosage ? Il s'agit de doser l'antigène HBe de l'hépatite B.
(1) Sur les microbilles est fixé en excès un 1er Ac spécifique d'HBe (anti 1er épitope d'HBe).
(2) L'HBe à doser se fixe sur les microbilles.
(3) L'HBE fixé sur microbilles est révélé par le 2ème Ac luminescent spécifique et en excès (sur un 2ème épitope d'HBe). (4) L'excès du 2ème Ac non fixé est éliminé par lavage.
(5) Le dosage est donné par la mesure de la luminescence des sandwiches formés par le triplet 1er Ac des microbilles-HBe-2ème Ac luminescent.
(6) Où est la compétition dans ce dosage ?